Mimosine increases the expressions of tyrosine phosphorylated protein in mouse seminal vesicles / La mimosina aumenta la expresión de la proteína tirosina fosforilada en las vesículas seminales del ratón

Acute effect of purified mimosine (MiMo) extracted from Leucaena leucocephala on testicular histopathology has been documented with seminal vesicle (SV) atrophy. Since protein phosphorylation and seminal secretions play important roles in sperm physiology, this study aimed to study the alteration of substances including tyrosine phosphorylated (TyrPho) proteins in seminal vesicle treated with MiMo. Male mice were divided into a control and experimental groups treated with purified MiMo at 3 doses of 15, 30, and 60 mg/KgBW, respectively for 35 consecutive days. The morphology and weights of SV were compared among groups. The levels of magnesium and fructosamine in SV fluid were assayed. The profiles of equally SV total proteins were compared using SDS-PAGE. The expression of seminal TyrPho proteins was detected by western blotting. Recent results showed the decreased weights of SV in MiMo treated mice compared to control. However MiMo in all doses did not affect the levels of magnesium and fructosamine in SV fluid. The SV protein expression of 130 and 55 kDas was obviously decreased in a high dose MiMo. In dose-dependent response, the expressions of 72 and 55 kDas TyrPho proteins of SV were increased. In conclusion, MiMo could affect SV morphological size and protein secretions especially TyrPho proteins.

El efecto agudo de la mimosina purificada (MiMo) extraída de Leucaena leucocephala en la histopatología testicular se ha documentado con atrofia de vesícula seminal (VS). Debido a que la fosforilación de proteínas y las secreciones seminales tienen un papel importante en la fisiología de los espermatozoides, este estudio tuvo como objetivo estudiar la alteración de sustancias como la proteína tirosina fosforilada (TyrPho) en vesículas seminales tratadas con MiMo. Los ratones se dividieron en un grupo control y un grupo experimental y se trataron con MiMo purificado en 3 dosis de 15, 30 y 60 mg / KgBW, respectivamente, durante 35 días seguidos. La morfología y los pesos de VS se compararon entre los grupos. Fueron analizados los niveles de magnesio y fructosamina en el fluido VS. Los perfiles de las proteínas totales de VS se compararon utilizando SDS-PAGE. La expresión de la proteína TyrPho en las vesículas seminales se detectó mediante transferencia de Western blot. Los resultados recientes muestran la disminución del peso de las VS en ratones tratados con MiMo, en comparación con el grupo control. Sin embargo, en ninguna de las dosis se vieron afectados por mimosina purificada los niveles de magnesio y fructosamina en el líquido de las VS. La expresión de la proteína en VS de 130 y 55 kDas disminuyó notablemente en una dosis alta de MiMo. En la respuesta dependiente de la dosis, aumentaron las expresiones de 72 y 55 kDas de las proteínas TyrPho en las VS. En conclusión, la mimosina purificada podría afectar el tamaño morfológico de las VS y la expresión de proteínas, especialmente las proteínas TyrPho.

Localization and changes of tyrosine phosphorylated proteins and ß actin in epididymis of rats treated with valproic acid / Localización y cambios de las proteínas tirosina fosforiladas y la ß actina en epidídimos de ratas tratadas con ácido valproico

Tyrosine phosphorylated proteins have been localized and identified in male reproductive tissues such as testis and capacitated/ acrosome reacted sperm except epididymis. The changes of such proteins are associated with decreased sperm quality of valproic acid treatment. This study aimed to investigate the presence and alterations of protein phosphorylation in epididymal epithelium and fluid of rats treated VPA. Sixteen adult male rats were divided into control and VPA-treated groups (n=8/ each). Treated rats were injected with VPA (500 mg/ kgBW, intraperitoneally) for 10 consecutive days. At the end of experiment, the monoclonal antiphosphotyrosine (clone 4G10) was used for immunohistochemistry to probe tyrosine phosphorylated proteins and also to examine the expression of such proteins using immuno-Western blotting in epididymal tissue and fluid. The result showed that positive reactivity of phosphorylated proteins was clearly observed in cytoplasmic principle cells, nuclei of apical & basal cells and sperm mass surrounded with epididymal fluids. The profiles of phosphorylated proteins in epididymal fluid were 182, 127, 80, 70, 57, 45, 34, and 31 kDas, respectively. Interestingly, VPA affected the changes of phosphorylated proteins and β actin in head, body, and tail epididymal fluids. We conclude that tyrosine phosphorylated proteins were detected in epididymal epithelium and fluid. The expressions of those proteins and actin were altered under VPA treating.

Las proteínas tirosina fosforiladas han sido localizadas e identificadas en tejidos reproductores masculinos tales como testículos y espermatozoides, capacitados a nivel acrosómico, excepto en el epidídimo. Los cambios de estas proteínas están asociadas con una disminución de la calidad del esperma en el tratamiento con ácido valproico (AVP). Este estudio tuvo como objetivo investigar la presencia y las alteraciones de la fosforilación de proteínas en el epitelio epididimal y en el fluido espermático de ratas tratadas con AVP. Dieciséis ratas macho adultas se dividieron en dos grupos: control y tratadas con AVP (n = 8 / cada uno). A las ratas tratadas se les inyectó AVP por vía intraperitoneal (500 mg / kg de peso corporal) durante 10 días consecutivos. Al final del experimento, se realizó inmunohistoquímica con la anti-fosfotirosina monoclonal (clon 4G10) para sondear las proteínas tirosina fosforiladas y también para examinar la expresión de tales proteínas usando inmunotransferencia Western, en tejido y fluido epididimarios. El resultado mostró reactividad positiva de proteínas fosforiladas en células citoplásmicas principales, en los núcleos de las células apicales y basales y en la masa de esperma rodeada por fluidos epididimarios. Los perfiles de proteínas fosforiladas en el fluido epididimal fueron 182, 127, 80, 70, 57, 45, 34 y 31 kDas, respectivamente. El AVP provocó cambios en las proteínas fosforiladas y en la β actina de los fluidos epididimarios de cabeza, cuerpo y cola del epidídimo. Concluimos que las proteínas tirosina fosforiladas se detectaron en el epitelio y el fluido epididimarios. Las expresiones de esas proteínas y de la β actina se alteraron bajo tratamiento con AVP.

Types and morphometric study of calcaneal articular facets on human tali of Thai population / Tipos y estudio morfométrico de las facetas articulares calcáneas en talus humano de la población tailandesa

Patterns and variant morphometries of calcaneal articular facets on talus are concerned before performing of joint ankle surgery, including used as a sex determination. Types of talar facets have been documented in many populations except in Thai race. Therefore, this study attempted to classify the types of talus facets and to measure the facet lengths on dried tali of Thais. The 372 dried tali (204 males, 168 females) from Khon Kaen University Bone Collection were observed for variant types and measured for their facet lengths. The facets were classified into 6 types: type I, tree facet are separated (1.88 %); type II (A), the anterior and middle facets are partially connected with predominant ridge (34.68 %); type II (B), the anterior and middle facets are partially connected with slight ridge (32.53 %); type III, the anterior and middle facets are fully fused to form a single facet (2.96 %); type IV, the anterior and middle facets are partially separated by a ridge and partly by a groove (27.42 %); type V, all facets are continuous fused to form a single facet (0.54 %). In addition, the morphometric lengths of AP (anterior to posterior process) and ML1&2 (medial to lateral process) in male are significantly greater than those of female. The AP, ML, and ML2 of male are 56.71±0.16, 41.63±0.18, and 37.85±0.36 mm, while of female are 51.21±0.12, 37.74±0.16, and 33.85±0.28 mm, respectively. This incidence can be used as ankle surgery consideration and an anthropological marker for sex determination of unidentified talus.

Los patrones y las variantes morfométricas de las facetas articulares calcáneas en el talus deben considerarse antes de la realización de la cirugía del tobillo a nivel articular, incluido su uso para la determinación del sexo. Se han documentado los tipos de facetas en el talus en muchas poblaciones, excepto en la raza tailandesa. Por lo tanto, este estudio clasificó los tipos de facetas del talus y se midieron las longitudes de las facetas del talus, en muestras secas de indiviuos tailandeses. Se analizaron 372 talus secos (204 de hombres, 168 de mujeres) de la colección de huesos de la Universidad Khon Kaen, se observaron distintos tipos de variantes y se midieron las longitudes de las facetas. Las facetas se clasificaron en 6 tipos: tipo I, faceta de árbol separadas (1,88 %); tipo II (A), facetas anterior y media parcialmente conectadas con la cresta predominante (34,68 %); tipo II (B), facetas anterior y media están parcialmente conectadas con una ligera cresta (32,53 %); tipo III, facetas anterior y media están completamente fusionadas para formar una sola faceta (2,96 %); tipo IV, facetas anterior y media están parcialmente separadas por una cresta y en parte por una ranura (27,42 %); tipo V, todas las facetas se fusionan continuamente para formar una sola faceta (0,54 %). Además, las longitudes morfométricas del proceso anterior o posterior (AP) y del proceso medial a lateral (ML1 y ML2) en el varón son significativamente mayores que las de la mujer. El AP, ML1 y ML2 de los hombres son 56,71 ± 0,16, 41,63 ± 0,18 y 37,85 ± 0,36 mm, mientras que las mujeres son 51,21 ± 0,12, 37,74 ± 0,16 y 33,85 ± 0,28 mm, respectivamente. Esta incidencia se puede utilizar como una consideración en la cirugía de tobillo y un marcador antropológico para determinar el sexo del talus no identificado.

Acute effects of mimosine purified from Leucaena leucocephala on male reproductive system of adult mice / Efectos agudos de la mimosina purificada de Leucaena leucocephala en el sistema reproductor masculino de ratones adultos

This study attempted to examine the acute effect of purified minosine extracted from Leucaena leucocephala on male reproductive system. Adults male mice were divided into 4 groups (n =8); control and 3 experimental groups treated with purified mimosine at different doses of 15, 30, and 60 mg/KgBW, respectively for 7 consecutive days. The morphological features and weights of body and reproductive organs including testis, epididymis plus vas deferens, and seminal vesicle were compared among groups. In addition, epididymal sperm concentration and the changes of histopathology of testicular tissues in all groups were observed. The results showed that mimosine in all doses did not affect mice body weights. However, all doses of mimosine could significantly reduce the absolute and relative weights of testis and seminal vesicle but not of epididymis plus vas deferens. Significantly, mimosine at doses of 30, and 60 mg/KgBW could decrease sperm concentration. Moreover, the seminiferous atrophy and degeneration were obviously found in mimosine treated mice as compared to the control. In conclusion, consumption of Leucaena leucocephala edible parts containing mimosine could damage male reproductive organs which may cause acute male subfertility or infertility.

Este estudio intentó examinar el efecto agudo de la mimosina purificada extraída de Leucaena leucocephala en el sistema reproductivo masculino. Se dividieron ratones machos adultos en 4 grupos (n = 8): un grupo control y tres grupos experimentales tratados con mimosina purificada a diferentes dosis de 15, 30 y 60 mg / Kg por peso, respectivamente, durante 7 días consecutivos. Se compararon entre los grupos, las características morfológicas y el peso corporal, los órganos reproductivos, incluyendo los testículos, el epidídimo más conducto deferente y vesícula seminal. Además, se observó la concentración de espermatozoides epididimarios y los cambios de la histopatología de los tejidos testiculares en todos los grupos. Los resultados mostraron que la mimosina no afectó los pesos corporales de los ratones. Sin embargo, todas las dosis de mimosina podrían reducir significativamente los pesos absolutos y relativos de los testículos y las glándulas seminales, pero no así del epidídimo y los conductos deferentes. La mimosina en dosis de 30 y 60 mg / Kg por peso podría disminuir significativamente la concentración de esperma. Además, se observó la atrofia y degeneración seminífera en ratones tratados con mimosina en comparación con el grupo control. En conclusión, el consumo de partes comestibles de Leucaena leucocephala que contienen mimosina podría dañar los órganos reproductivos masculinos, lo que puede causar subfertilidad masculina aguda o infertilidad.

Localization and identification of tyrosine phosphorylated proteins in adult Sprague-Dawley rat testis / Localización e identificación de proteínas de tirosina fosforilada en testículos de rata Sprague-Dawley adultos

SUMMARY: Spermatogenesis is a major process in testis occurring from puberty through life span of males. The tyrosine phosphorylation is assumed to play roles in spermatogenesis because this process is important for cell proliferations, divisions, and differentiations. However, the localizations and identifications of phosphorylated proteins in testicular tissue of adult male rats are still unclear. Therefore, this study attempted to immuno-localize and identify such proteins in testicular tissues of Sprague-Dawley rats. The monoclonal anti-phosphotyrosine (clone 4G10) was used to probe tyrosine phosphorylated proteins and also to examine the expression of such proteins using immuno-Western blotting in rat testis. The result showed that positive reactivity of tyrosine phosphorylated proteins was clearly observed in interstitial endocrine cells (Leydig cells), sustentocytes (Sertoli cells), spermatogonia, spermatocytes, and spermatids (round and elongated), respectively. The expressions of testicular tyrosine phosphorylated proteins were 200, 131, 93, 70, 60, and 48 kDas, respectively. In conclusion, testicular tyrosine phosphorylated proteins were localized in both germinal epithelium and interstitial endocrine cells of adult Sprague-Dawley rats.

RESUMEN: La espermatogénesis es un proceso importante en los testículos que ocurre desde la pubertad a lo largo de la vida de los machos. Se supone que la fosforilación de la tirosina desempeña papeles en la espermatogénesis, debido a que este proceso es importante para las proliferaciones, divisiones y diferenciaciones celulares. Sin embargo, las localizaciones e identificaciones de proteínas fosforiladas en el tejido testicular de ratas macho adultas todavía no están claras. Por lo tanto, este estudio intentó inmuno-localizar e identificar dichas proteínas en tejidos testiculares de ratas Sprague-Dawley. La anti-fosfotirosina monoclonal (clon 4G10) se usó para sondar proteínas tirosina fosforiladas y también para examinar la expresión de tales proteínas usando inmunotransferencia Western en testículo de rata. El resultado mostró que la actividad positiva de las proteínas tirosina fosforiladas se observó claramente en endocrinocitos intersticiales (células de Leydig), sustentocitos (células de Sertoli), espermatogonias, espermatocitos y espermátidas (redondas y alargadas), respectivamente. Las expresiones de las proteínas tirosina fosforiladas testiculares fueron de 200, 131, 93, 70, 60 y 48 kDas, respectivamente. En conclusión, las proteínas tirosina fosforiladas fueron localizadas en ambos epitelios germinales y endocrinocitos intersticiales de ratas adultas Sprague-Dawley.

Sexual dimorphism using the interstyloid distances and clinical implication for elongated styloid process in Northeastern Thailand / Dimorfismo sexual usando la distancia inter-estiloide y la implicación clínica del proceso estiloides elongado en el Noreste de Tailandia

Skeletal remains are crucial in forensic identification of the sex, especially human skulls including the styloid process, a bony projection from the skull. Hence, the objectives of the present study were undertaken to assess the value of the styloid process for the sex identification of unknown skulls and also to investigate the prevalence of elongated styloid process in 102 human dry skulls from the northeast Thai population. As a result, the interstyloid distances at both base and tip of the styloid processes were found to be significantly different between male and female specimens, although no significant difference was found in the length of the styloid process between males and females. In addition, the occurrence of the elongated styloid process was not associated with the gender, although its prevalent laterality on the left was recognized. It is suggested that the styloid process can be applied to the sex identification by measuring the interstyloid distance at the base or the tip of these processes.

Los restos óseos son cruciales para la identificación forense del sexo, especialmente en los cráneos humanos, incluyendo el proceso estiloides, una proyección ósea del cráneo. Por lo tanto, los objetivos del presente estudio consistieron en evaluar el valor del proceso estiloides en la identificación del sexo de cráneos desconocidos y también para investigar la prevalencia del proceso estiloides elongado en 102 cráneos secos humanos de la población del Noreste de Tailandia. Como resultado, se encontró que las distancias inter-estiloides tanto en la base y la punta de los procesos estiloides eran significativamente diferentes entre las muestras de hombres y mujeres, aunque no se encontró diferencia significativa en la presencia del proceso estiloides entre ambos. Además, la aparición del proceso estiloides elongado no se asoció con el sexo, aún cuando se observó su prevalencia en el lado izquierdo. Sugerimos que el proceso estiloides se puede utilizar en la identificación del sexo mediante la medición de la distancia inter-estiloide en la base o en la punta de estos procesos.